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選用牛血清白蛋白BSA需要考慮哪些問題

更新時間:2020-12-12      點(diǎn)擊次數(shù):1210
 
  牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。
  血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白BSA,又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點(diǎn)為4.7。
  牛血清白蛋白一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入牛血清白蛋白后,它可能起到保護(hù)或載體作用,不少酶類添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。對多數(shù)底物牛血清白蛋白而言,牛血清白蛋白可以使酶切更*,并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過1h時,牛血清白蛋白可以使酶更加穩(wěn)定,因?yàn)樵诓缓Q灏椎鞍椎姆磻?yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。
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